地黃中梓醇的含量測定

Dihuang
REHMANNIAERADIX
本品為玄參科植物地黃RehmanniaglutinosaLibosch.的新鮮或干燥塊根。秋季采挖，除去蘆頭、須根及泥沙，鮮用；或?qū)⒌攸S緩緩烘焙至約八成干。前者習(xí)稱“鮮地黃”，后者習(xí)
稱“生地黃”。

【性狀】鮮地黃呈紡錘形或條狀，長8～24cm，直徑2～9cm。外皮薄，表面淺紅黃色，具彎曲的縱皺紋、芽痕、橫長皮孔樣突起及不規(guī)則疤痕。肉質(zhì)，易斷，斷面皮部淡黃白
色，可見橘紅色油點(diǎn)，木部黃白色，導(dǎo)管呈放射狀排列。氣微，味微甜、微苦。
生地黃多呈不規(guī)則的團(tuán)塊狀或長圓形，中間膨大，兩端稍細(xì)，有的細(xì)小，長條狀，稍扁而扭曲，長6～12cm，直徑2～6cm。表面棕黑色或棕灰色，極皺縮，具不規(guī)則的橫曲紋。體重，質(zhì)較軟而韌，不易折斷，斷面棕黑色或?yàn)鹾谏?，有光澤，具黏性。氣微，味微甜?/span>

【鑒別】(1)本品橫切面：木栓細(xì)胞數(shù)列。栓內(nèi)層薄壁細(xì)胞排列疏松；散有較多分泌細(xì)胞，含橙黃色油滴；偶有石細(xì)胞。韌皮部較寬，分泌細(xì)胞較少。形成層成環(huán)。木質(zhì)部射線
寬廣；導(dǎo)管稀疏，排列成放射狀。
生地黃粉末深棕色。木栓細(xì)胞淡棕色。薄壁細(xì)胞類圓形，內(nèi)含類圓形核狀物。分泌細(xì)胞形狀與一般薄壁細(xì)胞相似，內(nèi)含橙黃色或橙紅色油滴狀物。具緣紋孔導(dǎo)管和網(wǎng)紋導(dǎo)管直徑約至92μm。
(2)取本品粉末2g，加甲醇20ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。另取梓醇對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照《薄層色譜法檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序》(附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)
于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇一水(14：6：1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本品粉末1g，加80％甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?/span>
2ml使溶解，作為供試品溶液。另取毛蕊花糖苷對(duì)照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液
2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯一甲醇一甲酸(16：0.5：2)為展開劑，展開，取出，晾干，用0.1％的2，2一二苯基一1一苦肼基無水乙醇溶液浸板，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

【檢查】水分生地黃不得過15.0％(附錄ⅨH第一法)。
總灰分不得過8.0％(附錄ⅨK)。
酸不溶性灰分不得過3.0％(附錄ⅨK)。

【浸出物】照水溶性浸出物測定法(附錄XA)項(xiàng)下的
冷浸法測定，不得少于65.0％。

【含量測定】梓醇照《高效液相色譜法檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序》測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈0.1％磷酸溶液(1：99)為流動(dòng)相；檢測波長為210nm。理論板數(shù)按梓醇峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
對(duì)照品溶液的制備取梓醇對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1ml含l0μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品(生地黃)切成約5mm的小塊，經(jīng)80℃減壓干燥24小時(shí)后，磨成粗粉，取約0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50m1，稱定重量，加熱回流提取1.5小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，濃縮至近干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
生地黃按干燥品計(jì)算，含梓醇(C15H22O10)不得少于0.20％。