二苯乙烯苷含量測定及研究

Heshouwu
POLYGONIMUUI、IFLORIRADIX
本品為蓼科植物何首烏PolygonummultiflorumThunb.的干燥塊根。秋、冬二季葉枯萎時采挖，削去兩端，洗凈，個大的切成塊，干燥。

【性狀】本品呈團(tuán)塊狀或不規(guī)則紡錘形，長6～15cm，直徑4～12cm。表面紅棕色或紅褐色，皺縮不平，有淺溝，并有橫長皮孔樣突起和細(xì)根痕。體重，質(zhì)堅實(shí)，不易折斷，斷面淺黃棕色或淺紅棕色，顯粉性，皮部有4～11個類圓形異型維管束環(huán)列，形成云錦狀花紋，中央木部較大，有的呈木心。氣微，味微苦而甘澀。

【鑒別】(1)本品橫切面：木栓層為數(shù)列細(xì)胞，充滿棕色物。韌皮部較寬，散有類圓形異型維管束4～11個，為外韌型，導(dǎo)管稀少。根的中央形成層成環(huán)；木質(zhì)部導(dǎo)管較少，周圍有管胞和少數(shù)木纖維。薄壁細(xì)胞含草酸鈣簇晶和淀粉粒。
粉末黃棕色。淀粉粒單粒類圓形，直徑4～50μm，臍點(diǎn)人字形、星狀或三叉狀，大粒者隱約可見層紋；復(fù)粒由2～9分粒組成。草酸鈣簇晶直徑10～80(160)μm，偶見簇晶與較大的方形結(jié)晶合生。棕色細(xì)胞類圓形或橢圓形，壁稍厚，胞腔內(nèi)充滿淡黃棕色、棕色或紅棕色物質(zhì)，并含淀粉粒。具緣紋孔導(dǎo)管直徑17～178μm。棕色塊散在，形狀、大小及顏色深淺不一。
(2)取本品粉末0.25g，加乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液濃縮至3ml，作為供試品溶液。另取何首烏對照藥材0.25g，同法制成對照藥材溶液。照《薄層色譜法檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序》(附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上使成條狀，以三氯甲烷一甲醇(7：3)為展開劑，展至約3.5cm，取出，晾干，再以三氯甲烷一甲醇(20：1)為展開劑，展至約7cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

【檢查】水分不得過10.0％(附錄ⅨH第一法)。
總灰分不得過5.0％(附錄ⅨK)。

【含量測定】二苯乙烯苷避光操作。照高效液相色譜法(附錄ⅥD)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈一水(25：75)為流動相；檢測波長為320nm。理論板數(shù)按2，3，5，4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷峰計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備取2，3，5，4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷對照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末(過四號篩)約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25m1，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，上清液濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干燥品計算，含2，3，5，4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷(C20H22O9)不得少于1.0％。
結(jié)合蒽醌照《高效液相色譜法檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序》測定。